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tomcat521銀蟲 (初入文壇)
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[交流]
提DNA過(guò)柱前為什么要加無(wú)水乙醇？ 已有3人參與
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用吸附柱法提全血基因組DNA，一般是20uL蛋白酶K+200uL全血+200uL裂解液，56°C 10min，之后要加200uL無(wú)水乙醇，然后過(guò)柱。 裂解后DNA和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)都在一起了，直接過(guò)柱，然后漂洗兩遍不就可以了嗎？ 為什么還要在過(guò)柱前加無(wú)水乙醇呢？ |
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2樓2016-12-13 09:59:46
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dna容易水，不溶于乙醇，dna析出來(lái)才能留在吸附柱上，再用水溶解而得到dna溶液。不加乙醇就和廢液一起倒掉了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-12-13 10:04:06
ziaoqiang
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過(guò)柱前加無(wú)水乙醇把dna沉降下去，然后再轉(zhuǎn)移到柱子里，沒必要吧，dna還不是在底部 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-12-14 11:51:44
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離心10min，取上清，加無(wú)水乙醇，轉(zhuǎn)移到柱子上，再離心，dna就留在柱子上了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-12-14 12:57:08
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