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蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中一些試劑的名稱和作用 已有3人參與
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1樓 1 三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為Tris)是一種有機(jī)化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備。例如,在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以與醛發(fā)生縮合反應(yīng)。 兩種溶液作用機(jī)制不同 Triton X-100是一種非離子表面活性劑,有破膜作用 tris-HCl具有緩沖pH值作用,是一種堿性裂解液 2 Triton X-100 (曲拉通 X-100)(磷酸緩沖液) 化學(xué)名稱為聚乙二醇辛基苯基醚,是一種優(yōu)異的表面活化劑,潤濕及洗滌劑。在免疫組織化學(xué)(厚切片) 和免疫細(xì)胞化學(xué)中,Triton X-100 被用來做細(xì)胞破膜劑/細(xì)胞通透劑,即在細(xì)胞膜上打孔。這樣抗體就能進(jìn)入內(nèi)與相關(guān)的抗原結(jié)合了。 Triton X100一般在阻斷緩沖液中或稀釋緩沖液中使用,基本不用做洗液。使用濃度0.2%。較厚的石蠟切片更應(yīng)該應(yīng)用Triton X100,這樣可以獲得更好的染色背景。 Tris-HCl提供一個一定pH值緩沖環(huán)境,它的作用根據(jù)其不同的PH有很多作用,可以被用作梯度洗脫液,封閉液,總而言之就是為了控制溶液的PH。 3 水飽和酚與Tris飽和酚的作用與區(qū)別 •以前一直用的試驗(yàn)盒抽提質(zhì)粒,產(chǎn)量最夠應(yīng)付試驗(yàn)需要;現(xiàn)在因客戶要求量比較大,而購買提粒大量提取試劑盒不劃算,決定采用手工大提質(zhì)粒——其中一步是飽和酚處理,差點(diǎn)就直接用了水飽和酚而犯錯誤了。 現(xiàn)把收集整理的水飽和酚與Tris飽和酚的作用與區(qū)別分享給大家,希望對大家有所幫助: 1、 水飽和酚(Phenol Water)又叫水平衡酚。水飽和酚的PH小于7,一般是PH為5.0左右,通常與異硫氫酸胍一起使用,用于細(xì)胞RNA的提取,在酸性環(huán)境中,DNA在酚相,RNA在水相。兩者就分開了。 2、 Tris飽和酚(Tris-phenol)一般PH大于7.8,用于DNA的提。 其中,酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,可以使細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會形成醌(兩個苯環(huán)),醌含有強(qiáng)自由基,會破壞核酸結(jié)構(gòu)。 同時,由于PH值大于7,在堿性環(huán)境中DNA處于水相,RNA處于有機(jī)相。從而分離上清,即可得到DNA 4 請問各位戰(zhàn)友,我的PH8.8的 tris的 配方是80ml水加18.165gtris堿,調(diào)PH值至8.8,可配膠時總是不凝,換別的實(shí)驗(yàn)室的PH8.8的tris它就凝了。請問是我的配方問題嗎?我都已經(jīng)重新配置過好幾次了,PH值應(yīng)該是準(zhǔn)確的,還有配完后要高壓嗎? 你的tris不合格,內(nèi)含氧化性雜質(zhì),導(dǎo)致過硫酸銨被大量氧化,請更換。 5 EDTA中文名稱為乙二胺四乙酸,是著名的金屬螯合劑, 我們常用的抗凝劑主要有兩類, 一類是Ca鈣離子螯合劑,如檸檬酸鈉,檸檬酸鉀,草酸鈉等, 另一類是生物活性抗凝劑,如肝素等, 當(dāng)血液中的鈣離子被螯合劑結(jié)合后,血液因沒有鈣離子而無法凝結(jié),如果EDTA能夠抗凝的話,應(yīng)該是遵循螯合鈣離子,而使血液無法凝固 6 Milli-Qwater 準(zhǔn)確的說: 超純水 是美國Millipore公司Milli-Q Academic A10超純水系統(tǒng)生產(chǎn)的。 美國Millipore公司Milli-Q Biocel型超純水系統(tǒng)。最適合細(xì)胞培養(yǎng)。全自動操作,產(chǎn)水量為1.2L/min,電阻率18.2MΩ.cm/25℃.總有機(jī)碳<10ppb,熱源<0.001Eu/ml。 美國Millipore公司Milli-Q Academic A10超純水系統(tǒng)。TOC數(shù)字顯示,UV燈更換顯示,水溫顯示,定期循環(huán)全自動操作,產(chǎn)水量為1.5L/min,電阻率18.2MΩ.cm/25℃.總有機(jī)碳<10ppb,特別適用AA、IC等的微量離子分析 7 乙酸銨的作用:沉淀蛋白質(zhì) 8 二烷基硫酸鈉;K12;AS;SDS;Sodium lauryl sulfate 十二烷基硫酸鈉又稱K12、AS簡稱SDS,結(jié)構(gòu)式CH3(CH2)11OSO3Na,分子量288.39。白色至微黃色粉末,微有特殊氣體,表觀密度0.25g/mL,熔點(diǎn)180~185℃(分解),易溶于水,HLB值為40.無毒。 用作丙烯酸酯乳液聚合的陰離子表面活性劑。貯存于陰涼、通風(fēng)、干燥的庫房內(nèi),防火、防水、防潮。 |
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