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細(xì)胞增殖生長方面實(shí)驗(yàn)
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實(shí)驗(yàn)方法原理 測定細(xì)胞絕對增長數(shù)值常用最簡便的方法。 一般過程為 1. 接種21 孔/24 孔板細(xì)胞（如用培養(yǎng)瓶時(shí)則21 瓶）。 2. 分7 組，每組3 孔（或瓶），培養(yǎng)一周（7 天），期間逐日檢測一組，計(jì)數(shù)。 3. 把7 天中的細(xì)胞數(shù)值繪成圖，即為細(xì)胞生長曲線。 實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)胞 試劑、試劑盒：胰蛋白酶 儀器、耗材：吸管 實(shí)驗(yàn)步驟 1. 懸液制備 取待測生長狀態(tài)良好細(xì)胞，增長至接近匯合時(shí)，向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液，37 ℃溫箱中消化，至細(xì)胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細(xì)懸液、計(jì)數(shù)； 2. 接種 向每孔中接種等量細(xì)胞，置溫箱中培養(yǎng)；把培養(yǎng)瓶中營養(yǎng)液倒入試管中并記錄下毫升量； 3. 計(jì)數(shù)檢測 從次日起，即開始檢測第一組每個(gè)孔（或瓶）中的細(xì)胞總數(shù)，用計(jì)算盤或用細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，取3 個(gè)孔的均值，如此至第7 組結(jié)束； 4. 繪圖 用座標(biāo)圖紙繪成生長曲線。 |
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