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Reasky新蟲 (初入文壇)
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[求助]
氯霉素抗性的質(zhì)粒轉(zhuǎn)到BL21里不長，怎么辦？ 已有1人參與
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老板從國外帶回來一個質(zhì)粒，氯霉素抗性的。 我先用它轉(zhuǎn)了DH5α，涂在氯霉素板上，長的很正常。 然后又用它轉(zhuǎn)了BL21，就不長了，即使轉(zhuǎn)幾百納克的質(zhì)粒也不長。 轉(zhuǎn)化的流程確定沒錯：冰浴30min，熱擊60s，冰浴2min，加LB培養(yǎng)基37℃復(fù)蘇1小時，涂板。 BL21感受態(tài)也沒問題，我從一管100μl的感受態(tài)里，各取一半作了不同的轉(zhuǎn)化，一管做這個氯霉素抗性的，一管做氨芐抗性的，氨芐的那個就長的很正常。 試了幾次了都這樣，求解惑。。@biostar2009@飛約瘋?cè)嗽?/u>@wizardfan@youlinglyw |
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2樓2016-12-24 15:51:04
jcstone1027
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我們也轉(zhuǎn)化過氯霉素的，DH5a都不好長，Bl 21更加會困難，你看一下培養(yǎng)時間，延長一些會不會好一些。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2016-12-24 16:14:56
Reasky
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4樓2016-12-24 16:47:45
5樓2016-12-26 08:58:30
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6樓2018-03-09 14:42:44
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