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蛋白純化問題 已有2人參與
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最近在做蛋白純化問題,一直純化不出來,主要是目的蛋白都掛不上鑷柱!需要說明的是,我是用AKTA儀器純化的,鑷柱是重新再生過的,別人一起純化,他都可以純化出來。 剛開始用PH7.4的A(20mM咪唑),B(500mM咪唑)液進(jìn)行純化,結(jié)果目的蛋白都沒有掛上鑷柱,后來換成PH8.0的A(不含咪唑),B(500mM咪唑)液還是掛不上鑷柱,這倒是是怎么回事呀?求各位大神支招!不勝感激。。 PS:我的蛋白是真核蛋白,分子量17KDa,用28a載體在BL21DE3中進(jìn)行可溶性表達(dá),然后再去純化 @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
至尊木蟲 (文壇精英)
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