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w雨過(guò)天晴j新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
Western blot目的條帶上有豎著的雜帶 已有1人參與
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如圖所示第一行的條帶，有豎著的雜帶，請(qǐng)問(wèn)是什么原因?qū)е碌�？第一張的圖的第一行條帶和第二張圖的第一行條帶，是不同小鼠的同一種組織樣本，上樣量差不多都是20幾微克，還有一點(diǎn)就是一個(gè)是十孔一個(gè)15孔膠，我想問(wèn)是什么原因?qū)е碌膸筒町愝^大，第一個(gè)比較清晰，第二個(gè)比較雜亂，是提蛋白樣品的原因？還是跟多少孔膠有關(guān)系？ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
| 你這個(gè)應(yīng)該算是跑膠拖尾現(xiàn)象，原因其實(shí)挺多，需要你分析一下你這個(gè)屬于哪種情況。1. 蛋白濃度測(cè)定不準(zhǔn)，導(dǎo)致上樣量過(guò)大，可以降低上樣量看看，改為15μg上樣 2 電壓過(guò)高，導(dǎo)致跑膠過(guò)快，溫度過(guò)高也是同理，會(huì)導(dǎo)致拖尾 3 蛋白要充分變性然后上樣 4 蛋白上樣要充分離心，然后取上清上樣，如果混有雜質(zhì)，也會(huì)導(dǎo)致蛋白出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。你可以嘗試從這幾個(gè)方面找找，看看是不是哪里沒(méi)有注意到，這些原因也僅供你參考，其深層的原因還需要你自己去分析。 |
2樓2016-12-30 08:39:00
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3樓2016-12-30 09:27:44
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下面的條帶都是同樣的樣本，只是不同的抗體，只有最上面的那個(gè)抗體才會(huì)出現(xiàn)這種拖帶的現(xiàn)象。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
4樓2016-12-30 10:18:16
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你好，請(qǐng)問(wèn)你找到原因了嗎？我也有同樣的問(wèn)題，一張膜上就一個(gè)蛋白出現(xiàn)孔兩邊長(zhǎng)長(zhǎng)的拖帶。懷疑是這個(gè)蛋白可以和某種不同大小碎片的東西結(jié)合了。你做的什么蛋白？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
5樓2017-03-23 20:00:17
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
6樓2017-04-19 13:34:38
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