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xxw192625金蟲 (初入文壇)
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[求助]
分子生物學(xué)考試，老師給了題目讓自己找答案，急求幫助！
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1.在人類細(xì)胞HepG2中，發(fā)現(xiàn)有一個(gè)重要的基因（如beta-catenin）存在缺失突變，測序證明該缺失是一段300nt的DNA丟失。該缺失突變發(fā)生后，該基因產(chǎn)生的mRNA水平升高，請通過實(shí)驗(yàn)確定該mRNA水平升高的機(jī)理。 2.已知一個(gè)毒素處理動物細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)該處理后的細(xì)胞有多個(gè)基因存在明顯的上調(diào)，其中HAT（組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶）存在明顯的上調(diào)，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證組蛋白乙�；�/去乙酰化是否與毒素處理后上調(diào)的基因存在相關(guān)性。 3.在環(huán)境中分離到一株病原菌，研究發(fā)現(xiàn)該病原菌沒有明顯的毒力蛋白因子，但是能夠分泌出一種次生代謝產(chǎn)物（化合物小分子結(jié)構(gòu)），該化合物可以進(jìn)入宿主細(xì)胞產(chǎn)生毒理效應(yīng)，主要表現(xiàn)為線粒體的損傷，ROS上調(diào)，細(xì)胞凋亡增加，繁殖能力下降。請結(jié)合組學(xué)的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來說明該代謝產(chǎn)物的生殖毒性是由線粒體損傷，ROS變化引發(fā)的。 4.已知基因A可以被激活調(diào)控，在基因A的ORF上游約300nt附近發(fā)現(xiàn)存在一個(gè)特異DNA序列CCAAT，該序列能夠與NFY蛋白復(fù)合物結(jié)合，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明該激活是NFY蛋白調(diào)控的。 4.已知基因A可以被激活調(diào)控，在基因A的ORF上游約300nt附近發(fā)現(xiàn)存在一個(gè)特異DNA序列YYGGCCYY，該序列能夠被蛋白C識別。已知蛋白B能夠激活A(yù)的表達(dá)，B蛋白體外已經(jīng)驗(yàn)證是一個(gè)Ser/Thr激酶，具有磷酸化蛋白C的能力，請?jiān)O(shè)計(jì)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究A被B調(diào)控的機(jī)理，以及B與C的關(guān)系。 6.假如你進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室開始研究一個(gè)DNA結(jié)合蛋白的功能，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)確定： 1. 該編碼基因在體內(nèi)的表達(dá)水平和組織/細(xì)胞特異性 2. 該蛋白的哪個(gè)結(jié)構(gòu)域具有DNA結(jié)合功能 3. 如何確認(rèn)該蛋白在體內(nèi)的生物學(xué)功能@biostar2009 |
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