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蛋白質(zhì)含量測定實驗 已有1人參與
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Bradford色法比Lowry法要簡單迅速,是測定蛋白質(zhì)濃度的選用方法。有些物質(zhì)會干擾這種檢測反應(yīng),它們是甘油、去污劑、2-巰基乙醇、乙酸、硫酸銨、和一些堿性緩沖系統(tǒng)。用脫氧膽酸/三氯乙酸沉淀蛋白可排除大部分這些干擾物質(zhì)的影響。 實驗材料 蛋白質(zhì) 試劑、試劑盒 牛血清、NaCl、考馬斯亮藍(lán) 儀器、耗材 分光光度計、離心機 實驗步驟 1. 分別在兩組微量離心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl補足至100 μl,同時以兩管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白對照。 2. 每管各加入1 ml考馬斯亮藍(lán)染料溶液,振蕩混勻,室溫放置2 min。 3. 用1 cm 光徑的微量比色杯測A595,取A595吸光值對標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線,并測量待腳樣品的A595,從BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線中確定待測樣品的濃度。 |
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