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ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項
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1樓 ELISA取樣及運輸注意事項 一、血清提取方法： 1.全血促凝管取血，輕輕顛倒兩三次，放置片刻讓全血凝固，凝固后3000轉15-30min離心取上清。 2.全血普通EP管取血，室溫放置2h左右，讓其凝固，凝固后3000轉15-30min離心取上清。 特別注意：取血清避免震蕩，以防止溶血，溶血會對結果有影響。 二、樣本取量及運輸 每個指標做單孔檢測，一個樣本需取血清30ul，3個復孔需90 ul，冰盒-20度中短時運輸（小鼠建議采取摘眼球取血，如果血樣有限在試驗方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合）。 三、樣本編號 樣本標號： 組別及樣本標號，要在管壁上標注清晰，特別注意6，9的區(qū)分，可以使用英文標注。切記提供我司樣本清單。 WB、Q-pcr取樣及運輸注意事項 一、細胞收集及保存 1、貼壁細胞胰酶消化后900轉5min離心至管底（非貼壁細胞直接離心），棄上清，將細胞凍存與-80度長期保存，-20度，暫時保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管，trizon或RNA樣本保存液中-80度長期保存。 2、組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存。后續(xù)用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環(huán)境中，或者放于有trizon或RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。 二、樣本運輸 短時2h左右冰袋或者液氮運輸，干冰（干冰可以維持-70度）密封郵寄運輸。 三、樣本編號 樣本標號清晰，切記提供我公司樣本清單。 病理實驗取樣及實驗注意事項 1、動物組織提取后（玉米粒大小即可）迅速保存于4%多聚甲醛中固定，管體標號，組織塊盡量少帶血液，或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗，常溫保存，常溫運輸。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內，樣本直徑小于2mm，常溫保存常溫運輸。提供我公司樣本清單。 2、細胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細胞培養(yǎng)板內，密封常溫運輸。做電鏡的細胞離心收集好后2.5%戊二醛固定，常溫運輸。 |
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