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[求助]
求助！關(guān)于蛋白表達(dá)量以及產(chǎn)量的測(cè)定 已有1人參與
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我想要知道每次發(fā)酵一定體積的菌液 能夠產(chǎn)生多少我的目的蛋白 現(xiàn)在想要制定一個(gè)準(zhǔn)確的定量方法 我個(gè)人的理解是： （1）關(guān)于目的蛋白表達(dá)量：利用SDS-PAGE跑全菌電泳 然后用灰度掃描軟件進(jìn)行條帶灰度掃描 可以大致確定目的蛋白占全菌蛋白的百分比 但是存在的問(wèn)題是：這種方法定量很不準(zhǔn)確 并且我至今也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)一個(gè)好用的灰度掃描軟件 軟件對(duì)于條帶的標(biāo)記會(huì)因?yàn)殡娪拘Чa(chǎn)生較大誤差 不該標(biāo)記的條帶會(huì)被標(biāo)記 該標(biāo)記的往往找不到等等 （2）關(guān)于蛋白的產(chǎn)量：取一定量的菌按照一定的方法進(jìn)行純化得到我們的目的蛋白 然后測(cè)得蛋白濃度 反推計(jì)算出全部發(fā)酵液能產(chǎn)多少蛋白 以上是我的理解 但是現(xiàn)在的問(wèn)題是由于一些原因我沒(méi)法進(jìn)行純化的實(shí)驗(yàn) 但我希望知道用什么方法能較準(zhǔn)確測(cè)定我這一批發(fā)酵液產(chǎn)的蛋白量 請(qǐng)各位大神給一個(gè)思路 謝謝 |
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十四_149樓2017-01-13 17:02:24
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