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Abrahamyang新蟲 (初入文壇)
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[求助]
煙草基因組提取呈現(xiàn)膠凍狀難溶物
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| 根據(jù)經(jīng)典CTAB法提取煙草葉片基因組DNA，加入異丙醇后出現(xiàn)白色絮狀沉淀，用70%乙醇洗滌后吹干，用水或者TE溶解，均難以溶解，呈現(xiàn)膠凍狀物質(zhì)，也無法再次用裂解液溶解，該怎么解決？尋求幫助 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
Abrahamyang: 金幣+5, ★★★很有幫助 2017-01-12 14:18:21
Abrahamyang: 金幣+5, ★★★很有幫助 2017-01-12 14:18:21
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按道理來說，煙草的DNA很好提取，你的問題我也沒有遇到過。說幾點(diǎn)，自己認(rèn)為可能的原因吧。 1） 盡量取幼嫩的煙草葉片，不要太多，1至2g就足夠了； 2）磨樣的時(shí)候盡量快，而且要磨徹底，用液氮磨樣或者直接在EP管里磨樣都可以； 3） 吸取上清的時(shí)候，要輕柔。氯仿異戊醇可以抽提兩次； 4）異丙醇沉淀后，酒精洗上兩次，吹干溶解。 另外，你仔細(xì)看看自己配的提取液啊什么的，不要有問題，PH值調(diào)對(duì)。 我能想到的，只有這么多了。 |
Abrahamyang9樓2017-01-11 19:43:31
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建議提取DNA的樣品不宜過多，用氯仿異戊醇抽提時(shí)不要吸到有機(jī)相，可以少吸一點(diǎn)上清，異丙醇用等體積低溫沉降DNA，再試試。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-01-10 23:55:11
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3樓2017-01-11 08:36:01
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4樓2017-01-11 18:35:04
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