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舒寫青春

新蟲 (初入文壇)

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[求助] 有做兩棲類胚胎的嗎？小妹想求助一下~ 已有1人參與

想問一下，怎樣很好的固定青蛙的胚胎？將來要做切片，多聚甲醛可以嗎？還有甲醇怎樣固定呀，求大神指教。

@gyesang 發(fā)自小木蟲Android客戶端

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1樓 2017-02-13 10:57:16

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youyudeyu123

金蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 生物化學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

組織固定于4%多聚甲醛24 h后取出修整使切面平整，置入梯度酒精脫水、浸蠟包埋。具體脫水和浸蠟包埋步驟如下：
（1）75%酒精中脫水4h；
（2）85%酒精中脫水2-4 h；
（3）90%酒精中脫水1-2 h；
（4）95%酒精中脫水1 h；
（5）100%酒精Ⅰ中脫水30 min-1h；
（6）100%酒精Ⅱ中脫水30 min-1h；
（7）無水乙醇二甲苯中透明5-10min；
（8）二甲苯Ⅰ中透明5-10min；
（9）二甲苯Ⅱ中透明5-10min（觀察透明效果）；
（10）石蠟Ⅰ中浸蠟1h；
（11）石蠟Ⅱ中浸蠟1h；
（12）石蠟Ⅲ中浸蠟1h
（13）包埋機包埋，修蠟塊。
將修整好的蠟塊置于石蠟切片機上連續(xù)切片，片厚4μm。將切片漂浮于45℃ 溫水表面展平，然后用防脫處理過的載玻片撈起，并放進60℃ 烘箱內(nèi)烘烤，最后將烘好的切片室溫保存?zhèn)溆谩?

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回復(fù)此樓

加油

2樓2017-02-16 08:15:39

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