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shi6625893金蟲 (小有名氣)
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[交流]
三片段的overlap,連接不上為什么 已有3人參與
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各位蟲友: 我要做三片段連接,想用overlap來(lái)做,但是我用sanpgen軟件設(shè)計(jì)引物,并在snapgen上模擬成功,但是實(shí)際做的時(shí)候卻連不上,我的三個(gè)片段長(zhǎng)度分別為1500,1300,1300左右,請(qǐng)問(wèn)為什么,有人做過(guò)嗎,有什么注意的地方嗎? |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
木蟲
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樓上說(shuō)的是試劑盒,用試劑盒可能會(huì)好些,我覺(jué)得你可以分別兩段擴(kuò)增,再拼接全長(zhǎng),直接擴(kuò)應(yīng)該是難度很大,并且容易有突變,還有就是做溫度剃度,看看怎么樣。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |

銅蟲 (小有名氣)
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overlap方法有時(shí)候好使,有時(shí)不行,建議用in fusion 同源重組方法融合多個(gè)片段,方法簡(jiǎn)單效率高 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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