 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 綜合其他 » 淋巴細胞的分離和激化實驗
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 905 | 回復: 0 | |||
[交流]
淋巴細胞的分離和激化實驗
|
|
一、實驗試劑 1. PBS（Dulbecco）： 0.10 g/L 無水CaCl2 0.20 g/L KCl 0.20 g/L KHPO4 0.10 g/L MgCl2.6H2O 8.00 g/L NaCl 2.16 g/L NaH2PO4.7H2O 調(diào)pH至7.4 2. 生長培養(yǎng)基： 不含谷氨酰胺的RPMI 1640培養(yǎng)基 10% FBS 慶大霉素（可不用）（10 μg/ml） 2 mmol/L L-谷氨酰胺 1 mmol/L 丙酮酸鈉 3. 促細胞分裂劑（終濃度） 5μg/ml PHA：1 mg/ml母液-20℃分裝凍存 25 μg/ml 刀豆凝集素A（conA）：0.4 mg/ml母液-20℃分裝凍存 商陸促分裂原：再水華母液-20℃分裝凍存 二、實驗步驟 1. 收集10 ml全血，加入不含防腐劑的肝素（0.2 ml肝素/10 ml全血）。實驗全過程保持無菌操作。 2. 在15 ml離心管中的肝素化血中加入1 ml 6%葡萄糖，室溫放置20~30 min，沉降紅細胞。沉降時間不宜過長，否則單核細胞將不再保留在富含白細胞的血漿。 3. 從葡聚糖處理的血中小心收集紅細胞上層的富含白細胞的血漿。 4. 富含白細胞的血漿室溫300 g離心8 min，沉淀細胞。 5. 棄上清，細胞輕懸于1 ml PBS中。 6. 于室溫下，用無菌巴斯德吸管小心將細胞懸液加在5ml Ficoll-Hypaque之上。此步操作要技術熟練，才能保持血漿曾在Ficoll-Hypaque層之間界面清晰。 7. 400 g低溫（4℃）離心30 min，沉淀細胞。離心后切記不要破壞管中的分層。 8. 淋巴細胞在血漿和Ficoll-Hypaque層之間的白色渾濁條帶中，小心取出貯存，棄紅細胞沉淀。 9. 5 ml PBS洗一次細胞，室溫250 g離心5 min，沉淀細胞懸于3~5 ml生長培養(yǎng)基中。 10. 全部細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25組織培養(yǎng)瓶，加促細胞分裂劑。 |
回復此樓» 猜你喜歡
工科材料085601 279求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復
-
一志愿南昌大學，327分，材料與化工085600
已經(jīng)有5人回復
-
274求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復
-
招收調(diào)劑碩士
已經(jīng)有11人回復
-
286分人工智能專業(yè)請求調(diào)劑愿意跨考！
已經(jīng)有4人回復
-
【考研調(diào)劑】化學專業(yè) 281分，一志愿四川大學，誠心求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復
-
一志愿吉林大學材料學碩321求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復
-
材料學碩297已過四六級求調(diào)劑推薦
已經(jīng)有5人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 實驗小課堂 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +4 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學校就去 +7 | sllhht 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 梁梁校校 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +7 | 為學666 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +6 | 緒幸與子 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +7 | 小材化本科 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿天大材料與化工（085600）總分338 +5 | 蔡大美女 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學 305求調(diào)劑 +4 | FY_yy 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070300化學319求調(diào)劑 +6 | 錦鯉0909 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學336分求調(diào)劑 +6 | zbzihdhd 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 0703方向310分求調(diào)劑 +3 | 努力奮斗112 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學一志愿川大藥學327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|