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藍紫色憂郁新蟲 (初入文壇)
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我跑SDS-PAGE時，泳道總是出現(xiàn)成片的藍色，難以脫掉， 在跑膠的時候就可以看到分離膠部分，溴酚藍指示前沿以上會出現(xiàn)黃色，這是為什么？ 另外，我的膠最下邊出現(xiàn)兩條帶，我應(yīng)該以哪一條作為溴酚藍指示前沿，能否說明我的樣品中有小分子量的蛋白？ 我用的是15%分離膠，5%濃縮膠，Marker的分力量范圍是1.2KD-45KD，樣品經(jīng)過酸沉淀，PBS復(fù)溶，AKTA純化。 求各位大神指點！謝謝！ IMG_1482.JPG |
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2樓2017-03-06 17:16:29
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-03-08 07:42:17
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哈哈，標記的意思是他想留個記號，以后好找這個留過言的帖子。 你這個膠給我的感覺是不是時間長了？上網(wǎng)緩沖液是自己配制的？ 肯定是應(yīng)該看最前面的 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-03-07 23:11:53
藍紫色憂郁
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5樓2017-03-08 11:35:17
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【答案】應(yīng)助回帖
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你的溴酚藍變黃是因為ph變化了，因為我看你寫了，你是酸純化的蛋白，再用PBS溶的，不知道你用akta怎么純化的，即使過柱了，也可能酸性很大，所以溴酚藍變黃。我猜測你這一板子上可能有純化前，和純化時多個時間點的收樣，ph對純化的很重要的，不知道你能否確定蛋白確實經(jīng)過了純化。你可以把你加樣順序?qū)懮稀?br /> 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
6樓2017-03-08 21:58:31
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10樓2017-03-10 10:51:56
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