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radiolabel銅蟲 (正式寫手)
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色譜定量分法：歸一法、外標法和內(nèi)標法的去切 已有5人參與
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色 譜 定 量 方 法 一、歸一化法 由于組分的量與其峰面積成正比，如樣品中所有組分都能產(chǎn)生信號，得到相應的色譜峰，那么可以用如下歸一化公式計算各組分的含量。 優(yōu)點：簡便、準確、定量結果與進樣量重復性無關(在色譜柱不超載的范圍內(nèi))、操作條件略有變化時對結果影響較小。 缺點：必須所有組分在一個分析周期內(nèi)都流出色譜柱，而且檢測器對它們都產(chǎn)生信號。不適于微量雜質(zhì)的含量測定。 二、外標法 用待測組分的純品作對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應信號相比較進行定量的方法稱為外標法。此法可分為工作曲線法及外標一點法等。工作曲線法是用對照物質(zhì)配制一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距。在完全相同的條件下，準確進樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測組分的信號，從標準曲線上查出其濃度，或用回歸方程計算，工作曲線法也可以用外標二點法代替。通常截距應為零，若不等于零說明存在系統(tǒng)誤差。工作曲線的截距為零時，可用外標一點法(直接比較法)定量。 三、內(nèi)標法 選擇樣品中不含有的純物質(zhì)作為對照物質(zhì)加入待測樣品溶液中，以待測組分和對照物質(zhì)的響應信號對比，測定待測組分含量的方法稱為內(nèi)標法�！皟�(nèi)標”的由來是因為標準(對照)物質(zhì)加入到樣品中，有別于外標法。該對照物質(zhì)稱為內(nèi)標物。 在一個分析周期內(nèi)不是所有組分都能流出色譜柱(如有難氣化組分)，或檢測器不能對每個組分都產(chǎn)生信號，或只需測定混合物中某幾個組分的含量時，可采用內(nèi)標法。 對內(nèi)標物的要求；①內(nèi)標物是原樣品中不含有的組分，否則會使峰重疊而無法準確測量內(nèi)標物的峰面積；②內(nèi)標物的保留時間應與待測組分相近，但彼此能完全分離(R≥1.5)；③內(nèi)標物必須是純度合乎要求的純物質(zhì)。 優(yōu)點：①在進樣量不超限(色譜柱不超載)的范圍內(nèi)，定量結果與進樣量的重復性無關。②只要被測組分及內(nèi)標物出峰，且分離度合乎要求，就可定量，與其他組分是否出峰無關。③很適用于測定藥物中微量有效成分或雜質(zhì)的含量。由于雜質(zhì)(或微量組分)與主要成分含量相差懸殊，無法用歸一化法測定含量，用內(nèi)標法則很方便。 加一個與雜質(zhì)量相當?shù)膬?nèi)標物。加大進樣量突出雜質(zhì)峰，測定雜質(zhì)峰與內(nèi)標峰面積之比，即可求出雜質(zhì)含量。但樣品配制比較麻煩和內(nèi)標物不易找尋是其缺點。 |
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2017-03-10 10:07:37, 123.19 K
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2樓2017-03-10 17:07:07
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3樓2017-04-21 15:18:04
mqh530
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