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stantontang金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于苯酚硫酸法測(cè)多糖問(wèn)題 已有8人參與
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測(cè)量方法 1.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖(或葡萄糖),配制成0。1g/L,分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,各以蒸餾水補(bǔ)至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻,室溫放置30分鐘以后于490nm測(cè)光密度,以2.0ml水按同樣顯色操作為空白,橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù),縱坐標(biāo)為光密度值,得標(biāo)準(zhǔn)曲線 每次測(cè)標(biāo)曲同樣的條件,得出的結(jié)果都不一樣,樣品平行樣之間差別都較大 問(wèn)題:加硫酸時(shí)到底是快速加入,讓其放熱還是慢慢加?快速加入時(shí),立馬變成橙黃色,慢慢加入時(shí),都不變色。 我都測(cè)了幾次了,沒(méi)一次穩(wěn)定的,求大神支招 哪位經(jīng)常測(cè)的,分享下技巧 |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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我都是貼壁加的硫酸,先加樣品,再加苯酚,最后濃硫酸。然后充分震蕩(很重要),然后等待時(shí)間,測(cè)定吸光值。 注意的點(diǎn):1.濃硫酸最后使用同一瓶,因?yàn)闈饬蛩崦恳黄窟是有差異的(廠家,批次) 2.苯酚我都是一次配置大量,夠用半個(gè)月的,不然每次配置還是有差異的 3.這個(gè)實(shí)驗(yàn)還是很靈敏的,操作手法(最好同一個(gè)人操作) 4.標(biāo)曲最好換了不同批次硫酸和新配苯酚都重新測(cè)量,不能一直使用最早做的標(biāo)曲,不然變化很大。 能想到的就是這么多,我做重復(fù)性還是很高的。 |
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (小有名氣)

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