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pcr出現(xiàn)目的條帶但序列不對(duì)是怎么回事
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我克隆目的序列，出現(xiàn)了目的條帶，膠回收后連接T載體，轉(zhuǎn)化，藍(lán)白斑篩選，出現(xiàn)了白斑和藍(lán)斑，然后菌液pcr，跑電泳后也出現(xiàn)了目的條帶大小的前段，送去測(cè)序，卻發(fā)現(xiàn)與目的片段不一致，這是怎么回事？懇請(qǐng)大牛指教 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-04-14 07:50:21
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-04-14 07:50:21
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連t載的測(cè)序結(jié)果看一下有沒有測(cè)出你的正反引物序列，正反引物區(qū)有了，測(cè)序沒問題。你再送pcr產(chǎn)物測(cè)序，產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果正確再連載體。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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ztt2792樓2017-04-02 11:00:14
3樓2017-04-02 12:03:07
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neuralcrest
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6樓2017-04-04 07:31:26
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7樓2017-04-04 07:41:49
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SFC瑋子
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9樓2017-04-13 17:43:02
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
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重新設(shè)計(jì)引物吧，如果連T載體的測(cè)序結(jié)果每條都不同，說明擴(kuò)出來(lái)時(shí)是混合條帶，就算是PCR產(chǎn)物測(cè)序也有可能測(cè)不出來(lái)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2017-04-13 23:13:40
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