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邊木殤木蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)菌全細(xì)胞 ELISA 實(shí)驗(yàn)方法 已有1人參與
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最近在做毛滴蟲和支原體的表面抗原與抗體篩選實(shí)驗(yàn)，用的全細(xì)胞10^6每孔，50nM NaHCO3緩沖液 4度過夜包被96板，之后過程跟indirect ELISA 一樣。但是結(jié)果OD值很低，懷疑細(xì)胞沒有包被到板子上，或者中間洗板的時(shí)候掉了很多。所以想求個(gè)細(xì)菌全細(xì)胞 ELISA 實(shí)驗(yàn)方法�。�！ ps. 不想要超聲裂解細(xì)胞碎片的方法，只要細(xì)胞表面蛋白坐抗原， 所以盡量保持細(xì)胞完整性 |
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邊木殤
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2樓2017-04-17 08:37:17
jfj_tj
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【答案】應(yīng)助回帖
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您好！我們也打算這樣做，但是針對(duì)您的那個(gè)問題，我在想： 1）您說OD值很低，是有多低呢？足夠說明效價(jià)存在的嗎？可不可以把細(xì)胞的量再加高一個(gè)數(shù)量級(jí)試試包被效果呢？ 2）有沒有可能您那邊使用的抗體是活性比較低，所以導(dǎo)致OD值低呢？或者有沒有質(zhì)控的比較； 3）我這邊有一個(gè)做白念的經(jīng)歷，發(fā)現(xiàn)超聲對(duì)表面蛋白的影響不大，所以建議您還是超聲毛滴蟲的細(xì)胞后，再包被試試看； 個(gè)人分析觀點(diǎn)，僅供參考。謝謝 |
3樓2017-04-18 16:47:36
pengmengwen
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邊木殤
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7樓2017-04-25 09:32:01
邊木殤
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8樓2017-04-25 09:32:49
蘇菲羅斯
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9樓2019-07-18 14:25:19
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