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邊木殤木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求細菌包被96孔板方法 已有2人參與
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最近在做毛滴蟲和支原體的表面抗原與抗體篩選實驗，用的全細胞10^6每孔，50nM NaHCO3緩沖液 4度過夜包被96板，之后步驟跟indirect ELISA 一樣。但是結(jié)果OD值很低，懷疑細胞沒有包被到板子上，或者中間洗板的時候掉了很多。所以想求個細菌全細胞 ELISA 實驗方法�。�！ ps. 最好不是超聲裂解細胞提碎片蛋白的方法，只要細胞表面蛋白做抗原， 所以盡量保持細胞完整性最好 |
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邊木殤
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2樓2017-04-17 08:37:42
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3樓2017-07-25 00:42:19
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【答案】應(yīng)助回帖
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邊木殤: 金幣+150, ★有幫助, 你做的是動物細胞嗎？還是癌細胞？ 2017-07-26 08:22:35
邊木殤: 金幣+150, ★有幫助, 你做的是動物細胞嗎？還是癌細胞？ 2017-07-26 08:22:35
| 你這個是包被蛋白的套路，我做了些cell-based ELISA，一般是用培養(yǎng)基種板10^5個過夜，第二天細胞貼壁后拿4%的多聚甲醛固定，封閉后加入一抗二抗進行。通過顯微鏡可以時刻觀察在各個實驗過程中細胞是否貼在板子上。不太了解你的毛滴蟲和支原體的情況，僅供參考。 |
4樓2017-07-25 09:18:03
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5樓2017-07-26 09:08:44
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