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設(shè)計(jì)引物時(shí)的小問題
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小白菜鳥一個(gè)啊剛剛接觸初級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作求大神指點(diǎn)! 我是要構(gòu)建質(zhì)粒，要插入一段目的基因，現(xiàn)在是用DNAMAN設(shè)計(jì)引物，求問 1. 下游引物前端要加上保護(hù)堿基和Sac I酶切位點(diǎn)的話，我自己編寫下來的順序應(yīng)該是“保護(hù)堿基（三個(gè)）+酶切位點(diǎn)+目的基因CDS最末數(shù)個(gè)堿基（從后往前�。┑幕パa(bǔ)堿基”嗎？ 2.下游引物用的酶識(shí)別位點(diǎn)本身就CG多，我的目的基因最后面也是CG巨多，保護(hù)堿基三個(gè)全用AT也沒用……這樣設(shè)計(jì)出來的引物發(fā)夾結(jié)構(gòu)超大呀，這種情況怎么辦呢？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-04-09 14:33:38
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