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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » T4連接的問題
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T4連接的問題 已有1人參與
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有A、B兩個目的片段，A大小400bp，B大小1700bp，兩個目的片段同時擴大，回收，T4處理，并同時連接3個不同載體，連接時間22度4h或16度過夜。挑斑檢測，A陽性率90%,B陽性率0%，排除目的片段有問題的可能，請問哪里出了問題？ @wizardfan @biostar2009 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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jurkat.1640
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2樓2017-04-13 12:00:45
送紅花一朵 |
謝謝你的解答，按照你所說的，如果我的B的量加少了，挑斑用兩頭通用引物檢測會出現(xiàn)空載嗎？因為我檢測B的時候發(fā)現(xiàn)全部都是空載的片段大小，也就是B沒有連上，然后載體發(fā)生自連了，可以這樣解釋嗎，載體是用CpoI和NotI酶切的 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2017-04-14 15:39:38
4樓2017-04-14 15:40:37
jurkat.1640
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5樓2017-04-14 16:44:25
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