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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 綜合其他 » 微生物SEM
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安格洛新蟲 (初入文壇)
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[求助]
微生物SEM 已有2人參與
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| 有沒有人做過SEM.不知能否給點意見，是這樣的，我一直在做SEM，但是每次結(jié)果都不怎么好，每次都會出現(xiàn)菌體結(jié)團或被淹沒，我的方法基本上現(xiàn)將菌體離心，在用超純水清洗培養(yǎng)基等，在加入2.5%的戊二醛磷酸緩沖液進行固定2-4個小時，在用超純水清洗里面的鹽類物質(zhì)幾次，在用乙醇梯度脫水，最后用叔丁醇置換脫水，再干燥。但是每次拍出的樣品菌體基本上是埋沒在其中，并不分散，不知道大家能否愿意分享相關(guān)經(jīng)驗 |
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2017-04-15 17:25:18, 1.27 M
2017-04-15 17:26:15, 1.27 M
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4樓2017-05-05 16:04:40
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2樓2017-05-05 10:24:46
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 收集對數(shù)生長期的新鮮菌液，無菌水洗滌3次，置于2.5%戊二醛磷酸緩沖液（pH7.2）中，于4℃固定過夜；次日以0.15%的同一緩沖液沖洗；然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分別脫水15 min；脫水后用醋酸戊脂置換乙醇；將上述樣品于真空冷凍干燥機中干燥 |
3樓2017-05-05 16:03:17
安格洛
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在外面也應(yīng)該是清晰的菌體啊 5樓2017-05-06 21:12:55
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