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leaverc1

新蟲(chóng) (初入文壇)

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專業(yè): 環(huán)境污染化學(xué)

[求助] 脲酶濃度測(cè)定

各位大神，最近要測(cè)定樣品中脲酶的濃度。采用了購(gòu)買的sigma的刀豆脲酶，來(lái)配置脲酶標(biāo)曲，同時(shí)測(cè)定了自己樣品中脲酶的濃度。分別采用了Brandford、lowry、BCA的方法來(lái)測(cè)定（紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)的），以及用了BCA的試劑盒（酶標(biāo)儀測(cè)的），但是發(fā)現(xiàn)標(biāo)曲和樣品測(cè)定的值都很奇怪。

其中一條標(biāo)曲
脲酶濃度（mg/l） 0 20 40 60 80 100 150
A595(考馬斯亮藍(lán)法) 0 -0.02 -0.016 -0.006 0.012 -0.017 0.021
A750(Lowry法) 0 -0.011 -0.008 -0.009 -0.007 -0.004 0.002

重配標(biāo)曲，也按照文獻(xiàn)中的方法重測(cè)了很多次，都是一樣

，還請(qǐng)各位大神指導(dǎo)下。是否脲酶結(jié)構(gòu)較為特殊？不適合用傳統(tǒng)方法測(cè)定？其有沒(méi)有較為針對(duì)性的測(cè)定方法？樣品濃度區(qū)間為：40-100 mg/L。謝謝大家

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1樓 2017-04-17 14:32:44

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茗漾rank

新蟲(chóng) (初入文壇)

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請(qǐng)問(wèn)是每次測(cè)待測(cè)蛋白含量都要做標(biāo)曲嗎？

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2樓2018-02-26 10:20:04