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shengang404新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助 ISSR數(shù)據(jù)分析的方法和操作步驟NTSYS軟件和popgene軟件及使用程 已有1人參與
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| 想用ISSR標(biāo)記做遺傳多樣性分析,ISSR結(jié)果已經(jīng)做出來(lái)了,求助 ISSR數(shù)據(jù)分析的方法和操作步驟,NTSYS軟件和popgene軟件及使用教程,郵箱:shengang404@163.com,衷心感謝! |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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NTSYS的數(shù)據(jù)格式它沒(méi)有分組功能,所以只是個(gè)體之間的遺傳距離, popgene的數(shù)據(jù)格式是把這些樣品按照采樣地點(diǎn)人為分成一組組,比較的是組與組之間的遺傳距離。你只用NYSYS分析是得不到群體之間的遺傳距離,只能得到個(gè)體之間的遺傳距離。 關(guān)于聚類(lèi)圖的區(qū)別也就在這里,算法是一樣的。你在NTSYS軟件得到的是18個(gè)樣品的聚類(lèi)圖,而在popgene里如果分成了3組,得到的就是3個(gè)組的聚類(lèi)圖。 樣品少,結(jié)果就不準(zhǔn)確,分析還是可以的。但是寫(xiě)文章的話樣本太少了, 除非你是用這些引物鑒定不同的物種遺傳距離,這樣的話你可以每個(gè)物種才一個(gè)樣。 |

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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您好,看了您發(fā)的帖子,感覺(jué)對(duì)這方面應(yīng)該比較了解了,特來(lái)請(qǐng)教。我最近也在做這個(gè)ISSR,用NTSYS分析聚類(lèi)結(jié)果。我用了18個(gè)不同的樣品,20種不同引物(每個(gè)引物有14個(gè)條帶位點(diǎn))。遇到的問(wèn)題是:在使用NTSYS這個(gè)軟件分析時(shí),對(duì)于每一種引物而言,做成的是一個(gè)14行,18列的0,1矩陣excel表,可看到木蟲(chóng)里大家都說(shuō)應(yīng)該把這20種引物的0,1數(shù)據(jù)放在一個(gè)excel表中去分析,如果是這樣的話,那就成了一個(gè)280行,18列的excel表, 求問(wèn): 1、在excel的第一行是不是應(yīng)該寫(xiě)1,280,18,0 ? 2、每種引物的位點(diǎn)分別為100bp,200bp,300bp……1000bp,2000bp,3000bp。將所有引物的0,1數(shù)據(jù)寫(xiě)在一起的意思是說(shuō),第一種引物從100bp ~3000bp寫(xiě)完后再寫(xiě)第二個(gè)引物,直到寫(xiě)完第20種引物的數(shù)據(jù)信息嗎? 3、如果按照2來(lái)操作,這么多數(shù)據(jù)混合在一起,能識(shí)別嗎?還是說(shuō)在最前面添加一列引物的名字做個(gè)說(shuō)明? 還請(qǐng)幫幫忙,不知道怎么繼續(xù)分析了,感謝感謝~ |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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感謝你的回答!其實(shí)我也是看了一些做ISSR的文獻(xiàn),基本都是用UBC隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增后,開(kāi)始統(tǒng)計(jì)條帶,然后用NTSYS,POPGENE進(jìn)行ISSR的多態(tài)性分析。對(duì)于這倆軟件我還有些困惑: 是不是NTSYS軟件是為了最終得到那個(gè)材料間的遺傳距離圖和在此基礎(chǔ)上形成的UPGMA聚類(lèi)圖? POPGENE軟件最終是為了得到一些具有遺傳意義的指標(biāo)?比如等位基因數(shù)(Na)、有效等位基因數(shù)(Ne)、Nei’s基因多樣性指數(shù)(H)這些 最后,我當(dāng)時(shí)可能掌握的不夠,不知道至少要20種,所以就取了18份不同地區(qū)的樣本材料,少于20份材料的話可以用POPGENE軟件來(lái)分析嗎?現(xiàn)在這些工作都已經(jīng)完成了,如果是這樣的話有什么補(bǔ)救措施嗎? |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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1. NTSYS得到的只是個(gè)體和個(gè)體之間的聚類(lèi)圖,如果你想得到UPGMA聚類(lèi)圖,還是得靠popgene。 2. 我說(shuō)的話可能有誤解,如果你想把這18個(gè)不同地區(qū)做群體,你起碼得取360個(gè)樣,如果有些地區(qū)實(shí)在找不到樣品那就沒(méi)辦法。但你每個(gè)地區(qū)就取一個(gè)樣本,這沒(méi)法分析,根本沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。如果你想補(bǔ)救,確定做哪個(gè)地區(qū)和哪個(gè)地區(qū)的多樣性分析,盡可能的奪取樣(>20)。 |

鐵蟲(chóng) (小有名氣)
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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按照您說(shuō)的這個(gè)意思,我只是在三個(gè)地區(qū)一共取了18個(gè)品種的樣品材料,從每個(gè)品種里邊取出部分組織葉片各做了一份實(shí)驗(yàn),所以在這樣的情況下用NTSYS軟件分析的話,得到的只是這18個(gè)個(gè)體之間的聚類(lèi)關(guān)系,而不是這三個(gè)不同地區(qū)的群體之間的關(guān)系,對(duì)嗎? 但是NTSYS軟件里面也要用到UPGMA算法,那這個(gè)得到的UPGMA聚類(lèi)圖和用POPGENE的得到的UPGMA聚類(lèi)圖二者有何區(qū)別呢? 另外,我目前這種情況是不是無(wú)法用POPGENE進(jìn)行分析遺傳多樣性了呢? 求指點(diǎn) ![]() ![]() |
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