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哈哈11111111新蟲 (初入文壇)
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[求助]
引物特異性 已有1人參與
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怎么才可以知道正在用的引物特異性怎么樣呢?總是擴(kuò)不出來,所以不知道是引物問題還是體系問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
至尊木蟲 (著名寫手)
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如果覺得是引物問題,就多設(shè)計(jì)幾對(duì),提高退火溫度可以提高特異性,降低退火溫度可以提高p出來的幾率。體系你可以用2x的pcr mix,引物用10微摩的加1微升,模板根據(jù)你的起始濃度加,1到5微升,其余的加水補(bǔ)足就可以,體系用體積25或50 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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