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不啦新蟲 (初入文壇)
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[求助]
來(lái)個(gè)大神幫我分析一下，PCR一直沒有條帶
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一開始做沒有條帶，然后就把酶，水都換了，然后還是沒有條帶，懷疑是引物那里出了問題，用的是十堿基的隨機(jī)引物，其實(shí)GC七個(gè)，AT三個(gè)，老師設(shè)的退火溫度35度，45秒，然后我用軟件分析的Tm值才23-24左右，有可能會(huì)這么低嗎？愁死了，不知道那里出的問題～ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-05-03 07:41:25
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-05-03 07:41:25
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那么低的退火溫度，話說都是順機(jī)引物了，怎么算出來(lái)的退火溫度啊。另外退火溫度太低了你的引物10個(gè)堿基里有7個(gè)GC估計(jì)都成引物二聚體了吧。提高退貨溫度到60度看看吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-05-02 23:15:32
倒春寒
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3樓2017-05-03 02:25:02
不啦
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4樓2017-05-03 08:08:07
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