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重組蛋白的純化 已有2人參與
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重組蛋白的純化 1. 重組蛋白 重組蛋白是利用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì),即人工設(shè)計的蛋白分子. 2. 重組蛋白的制備流程 基因篩選→基因重組→基因克隆→克隆篩選→蛋白表達→蛋白純化 基因篩選：即篩選到可翻譯表達目的蛋白的基因序列 基因重組：即將到的目的基因序列和其它輔助基因（表達質(zhì)粒等）序列連接起 來，形成新的基因序列 基因克隆：把重組的基因序列導(dǎo)入可繁殖的受體細胞中 克隆賽選：將帶有重組基因的克隆細胞從細胞群中賽選出來 蛋白表達：將克隆細胞擴大培養(yǎng)，在培養(yǎng)中讓目的基因得以翻譯表達，表達出 蛋白 3. 重組蛋白表達受體細胞的分類 1）原核生物細胞：主要是大腸桿菌、也有其它的比如枯草芽孢桿菌等 2）真核生物細胞：主要是酵母菌 3）哺乳動物細胞：主要是CHO細胞 4）植物組織細胞：比如水稻胚乳細胞 5）動物組織細胞：比如奶牛乳腺細胞 4. 按結(jié)構(gòu)重組蛋白分類 1）標簽融合重組蛋白：帶有非自身特定氨基酸序列 2）無標簽重組蛋白：無自身以外氨基酸序列 5. 按表達后蛋白的存在形式分類 1）胞內(nèi)可溶性表達蛋白：貯存在表達細胞內(nèi)且以單體存在于細胞內(nèi) 2）胞內(nèi)包涵體表達蛋白：貯存在表達細胞內(nèi)但以聚合體狀態(tài)存在 3）胞外分泌型表達蛋白：貯存在表達細胞的培養(yǎng)液中 1.png 2.png |
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