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愛跑圈的懶懶新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助!瓊脂糖凝膠電泳DNA片段和電壓的關(guān)系 已有3人參與
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做完pcr，跑凝膠電泳，片段大概七八百bp，以前電壓用220v，25min，但是每次拿出來膠，都感覺，膠很熱，會不會是電壓太高，溫度太高，對DNA電泳結(jié)果，有什么影響，適合用多大電壓，，求助! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-03 19:08:44
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2樓2017-06-03 16:32:06
木木向前沖
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-03 19:09:06
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-03 19:09:06
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我跑小片段，90v 25-30分鐘，沒什么問題，電壓和電流應(yīng)該不太影響 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-06-03 16:37:40
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有影響的，電壓、電流的強(qiáng)弱，跑的時間長短都會完成影響。比如，高電壓條件下，電泳時間過長，會使樣品跑太遠(yuǎn)，甚至超出了膠塊。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-06-03 21:03:42
sheng_1210
新蟲 (小有名氣)
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5樓2017-06-04 13:03:40
紫風(fēng)舞鳶
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- 專業(yè): 細(xì)胞增殖、生長與分化
6樓2017-06-05 14:02:41
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 七八百bp的話你用什么濃度的瓊脂糖膠？一般我們七八百bp的可以用百分之1.5或者百分之2的膠，150V10min足矣。百分之一濃度的瓊脂糖150V電壓Marker750bp條帶跑12min就能出膠孔1cm，可以掃圖看了。DNAbp大小和電壓應(yīng)該沒太大影響，電壓是跟著瓊脂糖膠塊大小走的，膠越大，電流會高，電壓會低。膠塊電泳時間越長越熱，濃度越大電泳越容易發(fā)熱。如果想條帶清晰好看，可以低壓慢跑，百分之一瓊脂糖膠80V跑半個小時，Marker750bp條帶出膠孔大概4~6cm，可以掃圖看了。 |
7樓2017-06-06 00:03:53
8樓2017-06-08 10:37:31
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