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sophiasjz新蟲 (初入文壇)
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[求助]
不同酶切位點(diǎn)的pcr產(chǎn)物與表達(dá)載體能否連接成功
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前幾天做了連接轉(zhuǎn)化，pcr產(chǎn)物與pMD18T連接后用BamHI和HIndlll雙酶切回收的目的條帶，而pET28a是用ecor I和sal I雙酶切回收的目的條帶，將2種產(chǎn)物進(jìn)行了連接轉(zhuǎn)化，菌落pcr結(jié)果鑒定陽性，但是雙酶切驗(yàn)證沒有目的條帶，且切出了2000bp以上的3條帶。 正常來說，酶切位點(diǎn)不一樣，怎么可能連接上呢，但是pcr確實(shí)陽性，什么原因 不同酶切位點(diǎn)的pcr產(chǎn)物與表達(dá)載體能否連接成功 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-06-08 12:35:45
MulanQahar
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3樓2017-06-08 14:15:37
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