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zhenliu1991新蟲 (初入文壇)
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[求助]
大片段DNA酶切連接效率怎么提高 已有2人參與
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| 求助。。(gòu)建文庫時,單酶切的基因組DNA,用T4連接酶連接時,小片段DNA(<50Kb)連接效率很高,每2ul連接產(chǎn)物可達到5000個以上的單克隆,但是大片段DNA(~80Kb)連接效率很低,每2ul連接產(chǎn)物只有到600左右的單克隆,都進行了脫鹽處理,也嘗試了目的片段與載體的多種比例,都不能達到高效率,為什么?怎么提高大片段的連接效率? |
新蟲 (小有名氣)


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