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ruilipan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
對(duì)硝酸纖維素膜上的蛋白質(zhì)染色 已有1人參與
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用甲基紅溴酚藍(lán)能染色蛋白質(zhì)嗎，我是想看我劃在硝酸纖維素膜上的抗體情況？或者大家有沒(méi)有其他方法？謝謝大家啦，急求 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+4, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-11 07:15:24
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西門吹雪170: 金幣+4, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-11 07:15:24
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1、硝酸纖維素膜是蛋白印跡最廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)，對(duì)蛋白有很強(qiáng)的結(jié)合能力，而且適用于各種顯色方法，包括同位素，化學(xué)發(fā)光（Luminol類）、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很簡(jiǎn)便，比如不需要甲醛預(yù)處理，只要在無(wú)離子水面浸潤(rùn)排出膜內(nèi)氣泡，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了；比如NC膜很容易封閉，也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長(zhǎng)時(shí)間，不過(guò)要注意的是純的硝纖膜在比較脆，又容易卷，操作要小心，不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途--因?yàn)榻?jīng)不起多次“折磨”。 2、可以使用考馬斯亮蘭染色了，配方如下： 考馬斯亮蘭R250 0.4g 100%TCA（三氯醋酸） 100ml 蒸餾水 100ml 脫色液： 冰醋酸 1000ml 甲醇 500ml 蒸餾水 8500ml 請(qǐng)根據(jù)你所需用量配置，以免浪費(fèi)。 |
2樓2017-07-05 20:18:30
ruilipan
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 蟲號(hào): 4015000
- 注冊(cè): 2015-08-10
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
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非常感謝您的回復(fù)，我制作試紙條的，在硝酸纖維素膜上通過(guò)劃膜儀噴的抗體，現(xiàn)在想看結(jié)合的抗體情況，所以想染下色，這種情況是考馬斯亮藍(lán)好還是麗春紅染液好呢 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-07-10 19:44:31
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