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w1angp2eng金蟲 (小有名氣)
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[交流]
PCR反應內(nèi)參CT值差異很大，如何理解 已有4人參與
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| 初次做PCR，將反轉錄RNA濃度統(tǒng)一調整到900ng（20μl體系）后, 即45ng/μl。然后按照程序進行熒光定量PCR，但是在實際中，內(nèi)參基因（β-actin）的CT值范圍從16-21不等。主要疑問有兩個，第一，內(nèi)參CT值范圍多大合適，是一致才可靠嗎？第二，目的基因CT值，在實際測定中空白的CT值大約在30左右，那是否意味著目的基因大于30就沒有太大意義，只是表明其表達量很低？ |
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2樓2017-07-18 15:01:02
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3樓2017-08-18 02:15:36
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4樓2017-08-18 16:52:46
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5樓2017-08-19 01:20:49
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6樓2017-08-20 16:33:50
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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反轉錄成cDNA是用相同量的RNA。不同的內(nèi)參Ct不同。一般Ct差異不超過1，我做的在0.5內(nèi)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2017-08-20 17:04:12
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8樓2017-08-21 00:08:57
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9樓2017-08-21 18:29:25
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10樓2017-08-21 23:53:10
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