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啤酒alep新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
提取植物葉片Dna上清黏稠怎么回事 已有2人參與
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我提取植物葉片DNA ，抽提以后的上清依然黏稠是怎么回事呀，我明明加了pvp 的，最后得出的結(jié)果也不好，260/230都不到1，有知道怎么解決的嗎 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-17 23:20:21
西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-17 23:20:21
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植物葉片含有多糖多酚，用CTAB裂解前，應(yīng)該用緩沖液漂洗，在進(jìn)行裂解 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
2樓2017-07-17 23:19:09
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-18 07:45:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-07-18 07:45:46
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1、不知道你提取的是什么植物，不過(guò)用酚氯仿方法提基因組DNA有顏色是很正常的事。 首先，肯定不是蛋白質(zhì)被吸上來(lái)了，你不放心可以少吸一點(diǎn)上清。由于某些植物中富含多酚多糖類物質(zhì)，當(dāng)從細(xì)胞中分離出來(lái)很容易氧化而轉(zhuǎn)變成溶于水相的有顏色的成分。 2、最可能的一個(gè)原因 是DNA濃度過(guò)大（DNA是長(zhǎng)鏈分子 粘稠是正常的。） 你可以通過(guò)紫外掃描檢測(cè)，一方面看看純度如何（260nm有沒(méi)有吸收峰，與280nm的od 比值？），另一方面計(jì)算一下其濃度就知道了是不是這個(gè)原因。 3、此外 可能蛋白質(zhì)沒(méi)有沉淀完全，在以上紫外檢測(cè)中也可知道的。如不純，可加入氯仿異戊醇再重復(fù)變性蛋白以純化之。 |
3樓2017-07-17 23:40:54
zhouxfd
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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4樓2017-07-18 01:04:49
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5樓2017-08-19 09:16:10
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6樓2017-08-21 07:44:42
myh1205
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
7樓2017-10-16 19:53:56
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