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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 分子生理 » 擬南芥突變體互補試驗
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shiliyusly新蟲 (小有名氣)
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擬南芥突變體互補試驗 已有1人參與
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大家好！關于擬南芥突變體互補試驗，我有個困惑，期待大牛們能幫我解答下，大謝��！ 互補試驗中，T1代抗性擬南芥到底能不能出現(xiàn)缺失的表型？ 我找到的幾篇SCI文章都是說T1代就出現(xiàn)了表型的，表型還相當?shù)拿黠@！ 但是理論上花序侵染法中，農桿菌只侵染雌配子體，所以所有的T1代苗都是雜合子Aa，但表型應該不會很明顯啊？并且我實驗得到的T1代也都沒有表型。 請問，T1代抗性植株可能出現(xiàn)明顯的表型嗎？什么情況出現(xiàn)？幾率大嗎？ |
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2017-07-27 07:47:43
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| 取決于轉入的拷貝數(shù)以及啟動子的強度。如果用35S強啟動子，基本上都會有表型出現(xiàn)，除非你插入的基因序列出了問題，如果是基因本身的啟動子，強度太低，插入的拷貝數(shù)也低的話，有可能不會出現(xiàn)明顯的表型。 |
2樓2017-07-26 15:14:11
shiliyusly
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謝謝你！你說的拷貝數(shù)，是指單拷貝，多拷貝插入嗎？只有單拷貝插入才有性狀分離。你的意思是多拷貝插入會出現(xiàn)明顯性狀嗎？關于多拷貝插入這塊我不是很懂 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2017-07-26 15:46:16
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4樓2017-07-26 16:02:01
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你要互補的基因突變是否只在純合的情況下才能觀察到表型， 如果答案為”是“， 那么理論上T1代轉基因植物應該觀察到表型互補的。當然，各個T1植物之間轉基因的插入位點是隨機的 ， 表達量也會有差異， 出現(xiàn)一些個體沒有表型很正常。但是， 如果你觀察了大于30株左右T1都沒有看到預期的表型， 我認為最有可能出現(xiàn)下列情況： 1） 先確定轉基因植物不是其它植株污染（你使用的轉基因構件確確實實在T1植物體內） 2） 構件的啟動子不正確，沒有在正確的細胞里面表達 3） 引起表型的突變和你研究的基因無關 |
5樓2017-07-26 18:18:33
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