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龍眼桂圓新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
PCR相關(guān)問(wèn)題 已有7人參與
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用設(shè)計(jì)好的引物(生物公司設(shè)計(jì)的)對(duì)模板DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增出的是只含目的基因的DNA 片段嗎??如果是這樣,那是每個(gè)模板DNA 都會(huì)含有目的基因嗎??比如引物的目的基因是(ATATA),那PCR時(shí)的模板DNA 里一定會(huì)有含(ATATA)的片段??剛接觸,很是想不通,求解答! 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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打個(gè)比方,你把模板理解成萬(wàn)里長(zhǎng)城,那么你的目的基因就是其中20-30米的一個(gè)長(zhǎng)度,而你設(shè)計(jì)的引物就是這20-30米長(zhǎng)度中的一兩塊磚頭。而PCR獲得目的基因的過(guò)程你也可以理解為以這一兩塊磚頭為起始終止點(diǎn),以原長(zhǎng)城為模板,將這20-30米的長(zhǎng)城復(fù)原,也就是得到了你的目的基因片段。 另外你說(shuō)的擴(kuò)增出的是否只含目的基因的DNA 片段,理論上來(lái)講是的。但是如果你引物特異性低,錯(cuò)配高等原因,就會(huì)出現(xiàn)期待意外的片段,也就是瓊脂糖凝膠電泳里出現(xiàn)的雜帶。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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擴(kuò)增出的肯定含有目的片段,但是不是只含有目的基因的片段,要看設(shè)計(jì)的引物,另外模板是dna雙鏈,肯定要含有目的基因片段 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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送紅花一朵 |
引物特異性低咋理解呀,還有我以為雜帶是兩個(gè)條帶的DNA有交叉? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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