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關(guān)于菌體破碎后分離上清及沉淀,用多少轉(zhuǎn)速合理?并且應(yīng)用較廣?
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采用蛋白為包涵體表達(dá)目的蛋白,跑電泳上清無(wú)目的條帶。 先要收集破碎后沉淀,可是0.5g的菌加1mLbuffer 超聲破碎1s停1s,收集12000rpm*10min后, 分為上清,濁液,和沉淀,并且傾斜取上清,沉淀不實(shí)依舊流動(dòng),我現(xiàn)在可以做哪些改進(jìn)呢? 我想要沉淀,感覺暫時(shí)分不開。 離心機(jī)最大轉(zhuǎn)速13000rpm,求指導(dǎo)。 并且破碎后管壁上有黑黑的一圈,那是什么呢? |
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