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dpsdxa212銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
求各位前輩幫忙分析一下：PCR產(chǎn)物電泳，出現(xiàn)彌散狀和雙條帶是什么原因 已有1人參與
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樣品1，2，3都是PCR產(chǎn)物。為什么樣品1出現(xiàn)彌散狀條帶，樣品3出現(xiàn)雙條帶 。2017.8.8 marker問題照片.png |
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彌撒可能是樣品模板兩多了或者循環(huán)數(shù)多了，有時候酶量過多也會導致調(diào)帶彌撒；雙帶可能是引物的非特異性擴增 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-08-09 11:05:42
cry_2013
木蟲 (正式寫手)
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4樓2017-08-09 13:38:56
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-08-11 07:46:58
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其實你的退火溫度比較低，可以嘗試提高退火溫度看看能不能減少非特異性擴展，平時我們擴展退火溫度一般設置為60°左右的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-08-10 15:39:42
dpsdxa212
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3樓2017-08-09 11:26:21
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-08-11 07:46:38
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你可以先在blast上看看你的引物是否容易發(fā)生特異性克隆，如果是建議重新更換引物，如果不是，有可能是模板不純，需要重新制備模板，或者你的引物保存不當導致引物降解了，這樣的情況還是重新合成引物吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-08-10 14:34:07
eric-amy
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7樓2017-08-10 16:36:41
dpsdxa212
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8樓2017-08-10 23:03:07
dpsdxa212
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9樓2017-08-10 23:08:29
dpsdxa212
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10樓2017-08-10 23:12:43
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