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1361120671新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于鈣離子熒光探針fluo-3的問(wèn)題 已有1人參與
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哪位朋友在植物細(xì)胞上應(yīng)用過(guò)fluo-3探針，最近做了很多次實(shí)驗(yàn)，不知道什么問(wèn)題，總是檢測(cè)不到鈣離子熒光，在熒光顯微鏡下觀察，什么都看不到。細(xì)胞原生質(zhì)體活力用FDA檢測(cè)過(guò)了，沒(méi)有問(wèn)題。請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)的朋友幫幫忙。萬(wàn)分感謝 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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1、檢測(cè)前細(xì)胞洗干凈，不要有血清干擾 2、確定fluo-3探針沒(méi)有過(guò)期，熒光沒(méi)有淬滅 3、熒光顯微鏡分辨率不高 4、可以試試加長(zhǎng)孵育時(shí)間，少清洗一遍 5、加大fluo-3探針濃度（實(shí)驗(yàn)結(jié)果都是對(duì)比出來(lái)的，每組處理一樣就可以，加的多少及孵育時(shí)間多上的影響不大的） |
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13611206712樓2017-08-21 16:40:22
1361120671
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3樓2017-08-23 11:10:40
4樓2017-08-23 16:50:20
1361120671
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5樓2017-08-23 20:38:30
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我想問(wèn)下樓主有遇到過(guò)像鈣離子熒光探針Fluo3-AM孵化葉片下表皮保衛(wèi)細(xì)胞的時(shí)候，表皮一直飄在染液上的問(wèn)題嗎？還有我用的汞燈綠光激發(fā)，感覺(jué)效果不怎么好啊。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
6樓2017-12-17 02:58:39
trickletof
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7樓2021-06-27 22:25:51
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