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白淺2009鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
人血清補體ELISA 已有1人參與
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剛開始做ELISA,第一次做的標曲還可以，樣品，陽性對照，陰性對照的數值也正常，就是有的樣品稀釋倍數太大，超過標曲范圍，打算重新稀釋 減少稀釋的倍數，第一次樣品1:500稀釋，第二次打算1:50稀釋，結果標曲正常，但是所有樣品值仍小于標準品最低濃度的OD值，并且陽性，陰性和樣品的吸收值差不多，兩次操作基本上差不多，唯一的不同就是人血清以及樣品稀釋液 ，第一次是沒拆封的血清，為了防止補體活化，融化成帶有碎冰的狀態(tài)測的，第二次是接著用的第一次的樣品測的。 樣品稀釋液第一次用的是滅了菌的純化水，第二次沒滅菌 ，不知道有影響沒，求大神幫助分析 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-08-25 20:53:09
【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數 +1
白淺2009: 金幣+66, ★★★很有幫助 2017-10-12 21:33:31
感謝參與，應助指數 +1
白淺2009: 金幣+66, ★★★很有幫助 2017-10-12 21:33:31
| 你的標曲和陰陽性每次實驗都是需要現稀釋的嗎？如果是，則第二次問題不是出在稀釋液上，如果不是就不排除稀釋液的問題。還有你第一次實驗說有些樣品稀釋倍數過大超出檢測限了，我想問一下你這次實驗中有測出來樣品是陽性或者說落在標曲的線性范圍內的嗎？如果都沒有，可能是樣品本身是不是經過什么處理導致補體都失活了，如果不是也有可能是樣品經過一次解凍過程補體成分降解了，好像說補體對凍融過程也比較敏感的。能不能把你的實驗步驟盡量說詳細了，可能就是某些不太在意的細節(jié)部分出問題了，而你自己沒有意識到，所以找不到原因。希望對你有幫助。 |
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白淺2009
3樓2017-08-26 15:49:12
白淺2009
鐵蟲 (小有名氣)
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- 注冊: 2012-11-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動力學
4樓2017-10-12 21:32:26
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