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我在你在木蟲 (初入文壇)
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[求助]
做WB時actin總不出,有時候需要孵育兩遍,目的蛋白也是,怎么解決 已有5人參與
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做western時,內(nèi)參actin經(jīng)常性不出,改變抗體濃度也試過 ,依舊不出,目的蛋白出的也不好,不知道什么原因,經(jīng)常需要孵育兩遍,最近一次做孵育兩遍依舊無actin,崩潰中,還有做wb前要測蛋白濃度么 ,蛋白濃度范圍在多少才合適,我之前測在30ug/ml左右,應(yīng)該不低吧。求大神指教。 |
捐助貴賓 (著名寫手)
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需要測蛋白濃度,30ug/ml的濃度太低了,上樣量每孔需要10ug以上,所以樣品濃度起碼得0.5mg/ml以上了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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上樣量增加一倍 actin濃度上調(diào) 抗體是國外的么 把批號以及包裝信息寫郵件發(fā)過去 也有可能是國內(nèi)小作坊套牌假抗體 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |

木蟲 (初入文壇)
木蟲 (初入文壇)
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