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Ivy_Yau新蟲 (初入文壇)
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[交流]
PCR反應(yīng)條件的改進(jìn)，求大牛 已有4人參與
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如題，我在做兩個(gè)種屬的目的片段擴(kuò)增，分別是大鼠和人的。 目的片段在最上面第一條marker的附近，大概2kb的大小 反應(yīng)程序如下： 98度 10min 98度 30s 58or62度 30s 68度 1kb/min 30-35cycle 68度 10min PCR用的是Takara的primerstar高保真酶 圖一退火溫度是62度，引物Tm69度左右 圖二退火溫度是58度，引物Tm64度左右 引物Tm值都是算上酶切位點(diǎn)的 覺得目的條帶太暗了，特別是圖片上左邊的條帶，膠回收后濃度只有20多ng/ul，有什么條件可以改進(jìn)的嗎？求建議！謝謝大家！ 用的是cDNA做模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增 |
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2樓2017-09-11 00:24:28
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3樓2017-09-11 08:42:03
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4樓2017-09-11 11:07:44
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5樓2017-09-11 11:29:12
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