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mayazhm_0新蟲 (初入文壇)
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[求助]
雞血提DNA 已有1人參與
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提DNA不是有降解就是提不出，說一下步驟想請大家看看有什么問題。前面好說，主要就是加了裂解液以后吹散沉淀，再離心啥的，然后最后加了SDS和蛋白酶K以后消化過夜。消化后面的就是加兩次飽和酚，一次苯氯醇，一次氯醇，都是取上清，搖床10分鐘離心10分鐘。然后加了無水乙醇后搖床加離心，沉淀漂洗什么的。DNA溶解1到3天都可能，但是送檢測DNA幾乎都不合格。后來問了另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的，消化完后面改成了加三次苯氯醇，手動(dòng)顛倒20次左右，然后靜置15min，離心15分鐘。然后在加了無水乙醇后手動(dòng)晃一會(huì)，絮狀沉淀用槍頭挑到新的ep管里。之后一樣。但是結(jié)果能出絮狀沉淀的特別少。我現(xiàn)在特別糾結(jié)，因?yàn)檫@些DNA是要送去測序的，到底我是步出問題了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2017-10-09 16:40:11
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3樓2018-03-10 21:59:23
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