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xiaoyue0327新蟲 (初入文壇)
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人血白蛋白多聚體含量測定為什么要除以2?
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藥典中關(guān)于人血白蛋白多聚體測定描述如下,有沒有哪位大神幫我解釋下,為啥要色譜圖中未保留(全排阻)峰的含量(%)除以2? 3121 人血白蛋白多聚體測定法 本法系用分子排阻色譜法測定人血白蛋白多聚體含量。 照分子排阻色譜法(通則0514)測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用親水硅膠高效體積排阻色譜柱(SEC,排阻極限300kD,粒度10μm),柱直徑7.5mm,長60cm;以含1%異丙醇的pH7.0、0.2mol/L 磷酸鹽緩沖液[量取0.5mol/L磷酸二氫鈉200ml、0.5mol/L磷酸氫二鈉420ml、異丙醇15.5ml及水914.5ml,混勻]為流動相;檢測波長為280nm;流速為每分鐘0.6ml。取每1ml含蛋白質(zhì)12mg的人血白蛋白溶液20μl,注入色譜柱,記錄色譜圖,人血白蛋白單體峰與二聚體峰間的分離度應(yīng)大于1.5,拖尾因子按人血白蛋白單體峰計算應(yīng)為0.95~1.40。 測定法 取供試品適量,用流動相稀釋成每1ml約含蛋白質(zhì)12mg的溶液,取20μl,注入色譜柱,記錄色譜圖60分鐘。 按面積歸一法計算,色譜圖中未保留(全排阻)峰的含量(%)除以2,即為人血白蛋白多聚體含量。 |
新蟲 (初入文壇)
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