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ajie52199新蟲 (初入文壇)
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[求助]
KM71H表達(dá)不出蛋白
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本人用P. pastoris KM71H表達(dá)一個基因，不但沒有檢測到活性，而且做WESTERN也檢測不到蛋白。現(xiàn)在懷疑會不會跟發(fā)酵條件有關(guān)。我實(shí)驗(yàn)室的方法是先用10 mL YPG培養(yǎng)基（yeast extract polypepton glycerol)培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)到190mL YPG, 第三天收集菌體，用無菌水洗過之后在40ML YP培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并加甲醇誘導(dǎo)，然后一直培養(yǎng)下去�？墒菦]有東西啊~~~~~~請問各位大神用什么方法發(fā)酵？謝謝謝謝�。。�！ |
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