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安塵懂起新蟲 (初入文壇)
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構(gòu)載體時(shí) ，菌批和質(zhì)批都有條帶，雙酶切沒有目的片段，是怎么回事？ 已有1人參與
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構(gòu)載體時(shí) ，菌批和質(zhì)批都有條帶，雙酶切沒有目的片段，是怎么回事？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-12-01 22:47:46
快樂的大腳
銅蟲 (初入文壇)
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0不知道你做pcr的引物用的什么 聯(lián)系 用載體上的一個(gè)引物 和自己基因上的一引物克隆 可以排除非質(zhì)粒片段干擾 1確認(rèn)條帶大小 是否有誤 確認(rèn)酶切效率 2連接轉(zhuǎn)化后多選些菌 做菌批 再酶切 3也可能由于酶切片段太小 電泳看不太出來 如果是這樣 建議增加酶切模板 瓊脂糖濃度加倍 跑電泳看看 4直接測(cè)序看看 理論上克隆出來了 應(yīng)該問題不會(huì)太大 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-12-02 10:06:54
快樂的大腳
銅蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
安塵懂起: 金幣+10, ★有幫助 2017-12-02 10:36:26
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安塵懂起: 金幣+10, ★有幫助 2017-12-02 10:36:26
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如果剛才0的方法片段能夠克隆出來 且片段大小無誤 基本上就是連上了 建議直接測(cè)序 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-12-02 10:15:15
5樓2017-12-02 11:17:07
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