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seanlee新蟲 (初入文壇)
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[求助]
qPCR數(shù)據(jù)處理求助，神奇的讓人頭大的計算 已有1人參與
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求助。關(guān)于qPCR數(shù)據(jù)處理的問題。就是檢測未處理組目的基因沒信號，也就是不表達(dá)，經(jīng)過分化處理后該基因表達(dá)，Ct值并且數(shù)值在35-38左右，計算相對表達(dá)量的時候怎么計算呢？未檢測到信號的是按照最大循環(huán)數(shù)40來計算嗎？可是如果這樣的話，數(shù)據(jù)就上調(diào)倍數(shù)大的嚇人，感覺統(tǒng)計的不科學(xué)，求數(shù)統(tǒng)高手指點(diǎn)？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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未檢測到信號的必須重新做啊，而且ct值應(yīng)該比較小才好，最好20左右。建議找些資料從原理到分析都好好看看 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
seanlee2樓2017-12-06 14:52:17
hanxiaominhu
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
seanlee: 金幣+30, ★★★★★最佳答案 2017-12-22 00:05:09
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
seanlee: 金幣+30, ★★★★★最佳答案 2017-12-22 00:05:09
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做熒光定量PCR時。由于本身是一種PCR，所以循環(huán)數(shù)太晚的話，一般就不用了，不準(zhǔn)了。35循環(huán)后起峰就算不能用了。你可以看看溶解曲線，估計不太好了吧�，F(xiàn)在你需要坐的是檢測一下內(nèi)參基因有沒有問題: 如果沒有，那就看看目的基因的引物怎么樣，別人做的怎么樣；如果內(nèi)參基因有問題，估計你前期操作有問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-12-06 16:20:08
seanlee
新蟲 (初入文壇)
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4樓2017-12-22 00:06:14
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