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[求助]
BmN細胞培養(yǎng)求助 已有1人參與
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各位老師，最近我培養(yǎng)的BmN細胞出現(xiàn)了很多問題，由于缺少經(jīng)驗，來這里請教。 BmN1.JPG中正常的細胞內(nèi)部都是比較平整干凈的，而總會有一部分細胞內(nèi)部像是皺縮的，同時也有部分細胞會碎裂，并且在BmN1.1中這些內(nèi)部不光滑有些皺縮的細胞都會成團聚集，不知道這是由于什么原因?qū)е碌摹?br /> 前面兩張圖是繼代后4-5天的樣子，BmN2和BmN2.2則是分完后的樣子，可以看到更多的細胞碎片，以及即將碎裂的細胞，同時這些碎裂的細胞基本都是那些成團聚集的細胞，這些細胞貼壁不緊，輕拍就可以掉落，同時吹打幾次后就會碎裂，是不是說明這些聚集的細胞已經(jīng)都是死了的細胞？出現(xiàn)這種現(xiàn)象通常都是由于什么因素導致的？請各位老師多多指教，謝謝大家了！！ 對了我們在使用的是Gbico新西蘭產(chǎn)的FBS，培養(yǎng)基是TC-100，最近打算換成SF900 II試試效果。 BmN1.jpg BmN1.1.jpg BmN2.jpg BmN2.2.jpg |
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2樓2017-12-17 09:31:23
【答案】應(yīng)助回帖
| 我養(yǎng)過一段時間BmN細胞，也是用TC-100培養(yǎng)基，細胞長得很慢，貼壁很緊。我通常都是按1/2傳代，這樣三四天就可以再傳或用了，傳密一點有個好處：細胞不至于長太久而局部聚團。在吹細胞時，我通常都是舊培養(yǎng)基去掉，新加兩毫升培養(yǎng)基進去來回幾下吹掉某一區(qū)域的細胞，移出來，再2ml吹另外一區(qū)域的細胞，再2ml...再2ml...這樣分多次吹一瓶細胞，每顆細胞并不會受到太大機械損傷，碎片也會少一些。如果還是嫌細胞碎片多，可以等細胞貼壁后，更換培養(yǎng)基。我的感覺是，傳BmN細胞，得有耐心。 |
3樓2017-12-18 14:05:15
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