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Rachel zou新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助】蛋白純化，不掛柱 已有1人參與
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原核表達(dá)的目的蛋白。載體用的pet28a,表達(dá)菌BL21，目的蛋白上清表達(dá)。加了6個(gè)組氨酸標(biāo)簽，用40mM的咪唑就洗脫了目的蛋白，后來(lái)探究了最適洗脫咪唑濃度，結(jié)果10mM就洗掉了。關(guān)鍵是雜蛋白也被洗脫了！目的蛋白濃度很高，跑膠條帶也清晰，只是雜蛋白太多。求助各位大神！ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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我們也是這個(gè)載體表達(dá)的蛋白，用purimag鎳磁珠純化還可以。你這個(gè)是不上樣量太大了？一般低濃度咪唑洗雜，高濃度咪唑洗脫。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
2樓2018-02-02 16:07:40
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