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風箏轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)銅蟲 (初入文壇)
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請教！熒光定量PCR測的兩個基因，用的一個內(nèi)參，能不能比較這兩個基因表達量的差異 已有1人參與
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| 請教！熒光定量PCR同時測了兩個基因，用的一個內(nèi)參，能不能比較這兩個基因表達量的差異？？？ |
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2樓2018-04-24 12:49:18
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2018-04-27 07:57:14
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2018-04-27 07:57:14
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不能。相對定量怎么計算我就不多說了，我們用了Ct值和2，Ct值的是達到設(shè)定的熒光閾值所需的循環(huán)數(shù)，它與初始模板數(shù)有關(guān)，2就是理想的指數(shù)遞增，但是 Ct值真的只與初始模板數(shù)有關(guān)嗎？如果換一條引物呢，那就不一定可吧�？梢娙绻覀冇貌煌囊铮敲幢容^兩個基因的表達量得到的結(jié)果可能還不一樣。為什么？不同引物pcr的長度不同，每個循環(huán)積累的熒光強度也不同，如果你的熒光引物每一輪pcr的長度很長，那么也減小Ct值，那么引物pcr的長度和應(yīng)該強度呈現(xiàn)正比，我們可以根據(jù)這個進行基因全長換算嗎？沒有看到過相關(guān)的參考文獻，應(yīng)該熒光定量pcr的兩種數(shù)據(jù)處理，相對定量走不通，所以你只能選擇絕對定量 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2018-04-27 03:01:47
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